1908年11月3日生于江苏省苏州市，祖父以善画名闻于苏州，自幼在苏州读书。1927年考入上海艺术大学，后转入上海南国艺术学院，并加入南国社，参加话剧演出、舞美设计和伴奏。1928年去南京中央大学艺术系，在徐悲鸿工作室学画。同时得到徐悲鸿的赏识和教诲，1929年在徐的资助鼓励下赴欧深造。先以优异的素描成绩考入巴黎高等美术学校西蒙教授工作室，后考入比利时[注: 比利时（The Kingdom of Belgium，Le Royaume de Belgique），位于欧洲西北部，东与德国接壤，北与荷兰比邻，南与法国交界，西临北海。]皇家美术学院，受到该院院长、欧洲著名现实主义画家巴思天的严格训练，因成绩卓著，1931年获全院油画评比的金质奖章。
1935年应徐悲鸿之邀回国，任中央大学艺术系讲师、教授。
1937年抗日战争爆发后在重庆组织青年画家成立战地写生团，到抗日前线开展美术活动。1943年赴甘肃[注: 甘肃省-甘肃省位于中国中部偏北。简称甘，又简称陇。介于北纬32°36′～42°47′,东经92°10′～108°43′。]、陕西、青海、西康等地旅行写生，并举办个人画展。
解放后担任过中央美术学院教务长、副院长和院长。1985年被法国政府和文化部授予文学艺术最高勋章。1988年又被比利时国王授予王冠级勋章。吴作人是中国画家中一人得到这两项荣誉的第一人。去世前为中国美术家协会主席，中国文联副主席。1997年春病逝。
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